Корма для животных. Определение содержания витамина А методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Высокоэффективный жидкостный хроматограф, состоящий из следующего оборудования.

• Насос, установленный для подачи элюента с постоянной объемной скоростью 1 см³/мин.
• Устройство для ввода ВЭЖХ.
• Колонка длиной 250 мм с внутренним диаметром 4,6 мм, набивная, неподвижная фаза состоит из октадециловых групп C18, присоединенных к кремнезему. Колонка считается удовлетворительной, если число теоретических тарелок не менее 4000, значение коэффициента емкости равно 0,6 в отношении изомеров ретинола. Рекомендуемый размер частиц от 5 до 10 мкм.
• Детектор, позволяющий производить измерение ультрафиолетового (УФ) излучения при длине волны 325 нм и оснащенный интегратором (системой обработки данных).

Спектрометр в УФ области спектра (или в УФ-видимой области спектра), обеспечивающий измерение поглощения при длине волны, определенной в 9.6, оснащенный кварцевыми кюветами с длиной оптического пути 10 мм.

Баня с кипящей водой.

Испаритель роторный вакуумный с водяной баней при температуре 40 °С.

Аппарат для экстракции

• Цилиндр для экстракции вместимостью 1000 см³ со шлифом по ГОСТ 1770 и притертой пробкой.
• Насадка, имеющая отводную трубку, обеспечивающая притертое соединение с цилиндром, оснащенная регулируемой сифонной трубкой, проходящей по центру.
• Трубка сифонная регулируемая с нижним концом U-образной формы для переноса верхнего слоя жидкости из цилиндра в делительную воронку вместимостью 1000 см³.

Мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм для фильтрования подвижной фазы и растворов проб для испытания.

Мельница лабораторная электрическая, обеспечивающая измельчение пробы до прохода через сито с размером отверстий 1,0 мм.

Сито с размером стороны квадратных ячеек 1,0 мм по ГОСТ Р 51568.

Мясорубка с размером отверстий в пластинке 4,0 мм.

Весы лабораторные по ГОСТ Р 53228 с наибольшим пределом взвешивания 500 г и допускаемой погрешностью однократного взвешивания ±0,001 г.

Колбы конические Кн-2-1000-42 ТХС по ГОСТ 25336.

Холодильники стеклянные лабораторные обратимые по ГОСТ 25336.

Воронки делительные ВД -1(2)-1000 ХС по ГОСТ 25336.

Воронки фильтрующие ВФ-1(3)-100 ХС по ГОСТ 25336.

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026 или фильтры.

Колбы круглодонные К-2-250-34 ТХС по ГОСТ 25336.

Колбы мерные 1(2)-50(250, 1000)-2 по ГОСТ 1770.

Пипетки градуированные 1(2, 3, 5)-1(1а, 2, 2а)-1-1(2, 5) по ГОСТ 29227.

Бюретки вместимостью 5 см³ по ГОСТ 29251.

Цилиндры мерные 1(2)-50(100, 250, 1000) по ГОСТ 1770.

Колбы мерные вместимостью 20 см³.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Калия гидроокись (КОН) по ГОСТ 24363, раствор с массовой долей 50%.

Спирт этиловый ректификованный (C₂H₅OH) по ГОСТ Р 51652 с объемной долей 95% или эквивалентный технический метилированный спирт.

2-пропанол (C₃H₇OH).

Эфир петролейный, интервал температуры кипения от 40 °С до 60 °С. Остаток после выпаривания должен быть не более 20 мг/дм.

Стандартный образец витамина А (ретинил-ацетата)

• Ретинил-ацетат, ацетат витамина А (C₂₂H₃₂O) молярной массой 328,5 г/моль, чистота не менее 90%.
• Ретинол, витамин А спирт (C₂₀H₃₀O)  молярной массой 286,5 г/моль, чистота не менее 90%.

Спирт метиловый (CH₃OH) специальной марки для ВЭЖХ.

Подвижная фаза для жидкостной хроматографии: метиловый спирт - дистиллированная вода в соотношении 770:30 по объему.

Натрий сернокислый (Na₂SO₄) по ГОСТ 4166, безводный.

Натрия аскорбат, раствор массовой концентрации 100 г/дм³.

Инертный газ, например, азот по ГОСТ 9293.