Молоко и продукция молочная. Определение состава стеринов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
ГОСТ 34456-2018
Настоящий стандарт распространяется на молоко и молочную продукцию и устанавливает метод определения состава стеринов с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Метод основан на проведении реакции омыления жировой фракции посредством метанольного раствора гидроокиси калия с последующей экстракцией смесью диэтилового эфира и гексана, разделением методом обращенко-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии и сравнением полученных хроматограмм стеринов со временем удерживания стандартных веществ.
Хроматограф жидкостной, включающий следующие элементы:
- инжектор;
- термостат с программированием температуры, обеспечивающий нагрев колонки до температуры (30 ± 2) °С;
- колонку хроматографическую с фазой С18 и типоразмером 4,6 х 250 мм, 5 мкм;
- детектор спектрофотометрический;
- программное обеспечение для обработки данных.
Весы по ГОСТ OIML R 76-1 с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более ± 1 мг.
Микрошприц вместимостью 0.020 см3.
Термометр жидкостный (не ртутный) диапазоном измерения от 0 °С до 100 °С, ценой деления шкалы 1 °С по ГОСТ 28498.
Часы 2-го класса точности по ГОСТ 27752.
Баня водяная термостатируемая.
Испаритель ротационный, с водяной баней, обеспечивающей поддержание температуры от 30 °С до 100 °С с погрешностью 12 °С.
Колба мерная 1-100-2 по ГОСТ 1770.
Пипетки 1-1-1-1.1-1-1-S по ГОСТ 29227.
Цилиндры 1(3)-100-2. 1(3)-250-2 по ГОСТ 1770.
Воронка делительная ВД-1-250 ХС по ГОСТ 25338.
Колба Кн-1 -250-29/32 ТС по ГОСТ 25336.
Стаканы В-1-150. В-1-250 ТС по ГОСТ 25336.
Холодильник ХШ-1-400-29/32 ХС по ГОСТ 25336.
Бумага лакмусовая голубая.
Ацетонитрил, х.ч. для хроматографии.
Калия гидроокись по ГОСТ 24363. х.ч., раствор в метаноле молярной концентрации 2,0 моль/дм3.
н-Гексан, х.ч., для хроматографии.
Метанол, х.ч.
Холестерин, содержание основного вещества не менее 95.0 %.
β-ситостерин, содержание основного вещества не менее 95,0 %.
Брассикастерин, содержанием основного вещества не менее 95.0 %.
Кампестерин, содержанием основного вещества не менее 96.0 %.
Стигмастерин, содержанием основного вещества не менее 95.0 %.
Эфир диэтиловый, х.ч.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
