Мясо и мясные продукты. Метод определения содержания хлорамфеникола (левомицетина) с помощью жидкостной хроматографии.
ГОСТ ISO 13493-2014
Область применения
Настоящий стандарт устанавливает метод определения содержания хлорамфеникола (левомицетина) в мышечной ткани мяса, включая мясо птицы, с помощью жидкостной хроматографии.
Данный метод применим для определения хлорамфеникола при его содержании более 6,5 мкг/кг.
Сущность метода
Хлорамфеникол из части пробы для анализа экстрагируют водой. Экстракт фильтруют и полученный водный раствор очищают от липофильных компонентов методом твердофазной экстракции. Хлорамфеникол элюируют с экстракционного патрона дихлорметаном. Органический растворитель выпаривают и остаток очищают с помощью жидкостной экстракции в системе вода - толуол. Хлорамфеникол определяют методом обращенно-фазной хроматографии с детектированием в ультрафиолетовой (УФ) области спектра.
1. рН-метр.
2. Мембранный фильтр с малым мертвым объемом и размером пор 0,22 мкм.
3. Механическое или электрическое устройство, пригодное для измельчения образца.
В качестве такого устройства могут быть использованы высокоскоростной ротационный куттер или мясорубка с решеткой, диаметр отверстий которой не превышает 4,0 мм.
4. Лабораторный гомогенизатор
5. Фильтровальная бумага обеззоленная быстрофильтрующая диаметром примерно 15 см.
6. Экстракционные патроны вместимостью 20 см3 с диатомитовой землей, которая задерживает липофильные компоненты из водных растворов.
7. Водяная баня или нагревательный блок, позволяющие поддерживать температуру (40±1)°С с устройством для выпаривания потоком азота (см. 5.2), или ротационный испаритель.
8. Центрифужные пробирки вместимостью 25 см3.
9. Смеситель для пробирок типа Вортекс, обеспечивающий частоту вращения примерно 700 мин-1.
10. Центрифуга, обеспечивающая радиальное ускорение примерно 1000 g.
11. Микропипетки вместимостью 300 мм3.
12. Жидкостной хроматограф, оборудованный:
- насосом постоянного потока;
- инжектором;
- хроматографической колонкой внутренним диаметром 3 мм, длиной 20 см, заполненной обращенной фазой С8 или С18 с размером частиц 5 мкм, или другой колонкой с эквивалентными характеристиками;
- детектором УФ/ВИД, обеспечивающим измерение при длине волны 285 нм, если возможно - диодно-матричным детектором (используется для подтверждения обнаружения хлорамфеникола);
- самописцем с регулируемым диапазоном измерения или интегратором.
