Мясо и мясные продукты. Определение сорбиновой и бензойной кислот методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
ГОСТ 33809-2016
Настоящий стандарт распространяется на мясо, включая мясо птицы, субпродукты, мясные и мясосодержащие продукты, и устанавливает метод определения массовой доли сорбиновой и бензойной кислот и их солей (сорбат натрия Е201, сорбат калия Е202, сорбат кальция Е203, бензоат натрия Е211, бензоат калия Е212, бензоат кальция Е213) с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в ультрафиолетовой (УФ) области спектра.
Диапазон определения массовой доли сорбиновой и бензойной кислот и их солей составляет от 0,01% до 2,00%.
Метод основан на экстракции сорбиновой и бензойной кислот и их солей из гомогенизированной пробы раствором трихлоруксусной кислоты, центрифугировании с осаждением белков и последующем ВЭЖХ анализе в ультрафиолетовой (УФ) области спектра. Идентификацию сорбиновой и бензойной кислот и их солей осуществляют по абсолютному времени удерживания, а массовую долю определяют по площади хроматографического пика анализируемого образца, сопоставляя с пиком образца сравнения заведомо известной концентрации.
Хроматограф высокоэффективный жидкостной, укомплектованный:
- детектором УФ, обеспечивающим измерения при длине волны 235-270 нм с пределом определения не менее 0,01% по пику сорбиновой и бензойной кислот;
- насосом плунжерного типа;
- хроматографической колонкой для ВЭЖХ длиной 50-150 мм и диаметром 2,1-4,6 мм, с обращенной фазой С18 размером частиц 1,8-5,0 мкм, имеющей эффективность не менее 5000 теоретических тарелок по пику сорбиновой и бензойной кислот;
- блоком термостатирования колонок с поддержанием температуры 30°С с точностью ±0,1°С;
- устройством для ввода пробы с переменным объемом;
- записывающим устройством с компьютерным управлением и автоматической программой обработки хроматографических данных.
Весы с пределами допускаемой абсолютной погрешности не более ±0,02 мг.
Мясорубка бытовая по ГОСТ 4025 или электромясорубка бытовая по ГОСТ 20469.
pH-метр со стеклянным и хлорсеребряным электродами (или комбинированным стеклянным электродом) с диапазоном измерений от 0 до 14 ед. pH с пределом допускаемой абсолютной погрешности не более ±0,01 ед. pH.
Гомогенизатор лабораторный, с частотой вращения ротора не менее 10000 об/мин.
Холодильник бытовой электрический по ГОСТ 26678.
Баня ультразвуковая лабораторная с регулятором времени.
Часы электронно-механические по ГОСТ 26272.
Центрифуга лабораторная, с центробежным ускорением 4000 g.
Банки стеклянные вместимостью 250-500 см3.
Пипетки градуированные 1-2-1-5, 1-2-1-10 по ГОСТ 29227 или дозаторы автоматические с переменным объемом дозирования 5 см3 и 10 см3 и относительной погрешностью дозирования не более ±1%.
Пробирки центрифужные из полипропилена вместимостью 50 см3.
Фильтр мембранный из политетрафторэтилена с диаметром пор 0,45 мкм.
Колбы мерные 2-50-2, 2-100-2, 2-1000-2 по ГОСТ 1770.
Колба коническая Кн-1-100-24/29 ТС по ГОСТ 25336.
Флаконы - виалы хроматографические из темного стекла вместимостью 2,0 см3.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709 или вода для лабораторного анализа по ГОСТ ISO 3696, степень чистоты 1.
Калий фосфорнокислый однозамещенный по ГОСТ 4198, х.ч.
Кислота ортофосфорная по ГОСТ 6552, х.ч.
Кислота трихлоруксусная с содержанием основного вещества не менее 99,0%.
Кислота сорбиновая с содержанием основного вещества не менее 99,0%.
Кислота бензойная с содержанием основного вещества не менее 99,5%.
Ацетонитрил для хроматографии, х.ч.
