Определение меламина в молоке и молочных продуктах. Методические указания.
МУК 4.1.2420-08
Настоящие методические указания устанавливают метод жидкостной хроматографии высокого разрешения для определения в пищевых продуктах массовых концентраций меламина в диапазоне 1,0 – 100,0 мг/кг и предназначены для органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также других испытательных лабораторий, аккредитованных в порядке, установленном Правительством Российской Федерации, осуществляющих контроль качества и безопасности продовольственного сырья и продуктов питания.
Методика основана на определении меламина в молоке и молочных продуктах методом обращеннофазной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием диодно-матричного детектора или УФ-спектрофотометрического детектора с переменной длиной волны (длина волны 236 нм) после экстракции водным раствором трифторуксусной кислоты или смесью ацетонитрил–вода 50:50.
В качестве арбитражного метода используют метод ВЭЖХ с масс-спектрометрическим детектированием.
Таблица 1 - Метрологические характеристики метода, установленные для разных концентраций меламина в пробе.
| Метрологические характеристики | При концентрации меламина в пробе 2,0 мг/кг |
При концентрации меламина в пробе 20,0 мг/кг |
|---|---|---|
| Границы относительной погрешности (показатель точности) (± δ), %, Р = 0,95 | 13,10 | 7,65 |
| Стандартное отклонение повторяемости (σr), мг/кг | 0,37 | 2,15 |
| Предел повторяемости (r), мг/кг | 0,99 | 5,8 |
| Предел обнаружения, мг/кг | 1,0 | |
| Предел количественного определения, мг/кг | 5,0 | |
| Полнота извлечения веществ, % | 78,5 | 92,0 |
Образцы анализируют методом ВЭЖХ на жидкостном хроматографе с насосом высокого давления с подачей растворителя от 0,1 до 5,0 см3 /мин, оборудованном спектрофотометрическим детектором с переменной длиной волны и системой для сбора и обработки хроматографических данных.
Жидкостный хроматограф с насосом высокого давления с подачей растворителя от 0,1 до 5,0 см3 /мин.
Хроматографическая колонка с силикагелем, химически связанным с октадецилсиланом (ODS или C18), размер частиц 5 мкм, длина колонки 250 мм, внутренний диаметр колонки 4,6 мм, или аналогичная.
Система ВЭЖХ-МС: масс-спектрометр Agilent MSD Trap SL «ионная ловушка» или аналогичная.
Спектрофотометрический детектор с переменной длиной волны и системой для сбора и обработки хроматографических данных "Мультихром", версия 1,5х (Амперсенд, Россия) или аналогичной.
Микрошприц МШ-25 для жидкостной хроматографии или аналогичный.
Ультразвуковая установка, например, Ultrasonic Cleaner, CTBRAND, с частотой ультразвука 43-45 КНz или аналогичная.
Аппарат для встряхивания проб типа АВУ-6С, ТУ 64-1-2451-78 или аналогичный.
Центрифуга с числом оборотов не менее 10 000 об/мин или аналогичная.
Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 200 г и погрешностью ± 0,0001 г.
Блендер.
Колбы мерные наливные 2-50-2, 2-100-2, 2-250-2, 1-1 000-2 по ГОСТ 1770.
Колбы плоскодонные по ГОСТ 25336 с конусом 14/23 вместимостью 100 см3.
Цилиндры по ГОСТ 1770 вместимостью 100 см3.
Пипетки 4-1-2 или 5-1-2, 4-2-10 или 5-2-10, 4-2-25 или 5-2-25 по ГОСТ 29227.
Вайл (емкость 4-6 см3 с герметично завинчивающейся крышкой).
Фильтры беззольные ФО-ФС-15 «Синяя лента», ТУ 2642-001- 42624157-98.
Фильтры капроновые марки 0,45 мкм RC или аналогичные.
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии с коэффициентом пропускания на 220 нм не менее 95 % или выше.
Вода дистиллированная, ГОСТ 6709.
Гексансульфокислота, осч.
Гидроксид натрия, осч.
Кислота трифторуксусная > 99,8 %, хч, ГОСТ 18270—72, водный раствор с концентрацией 50,0 %.
Лимонная кислота, осч.
Меламин, > 99,8 %.
Метанол, осч.
Натрий уксусно-кислый, 3-водный, ГОСТ 199—68, хч.
Тест-система Abraxis melamine plate kit производства ООО «Стайлаб» или аналогичная.
