Продукция пищевая. Определение ацесульфама калия, аспартама и сахарина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
ГОСТ EN 12856-2015
Настоящий стандарт устанавливает метод определения ацесульфама калия, аспартама и сахарина в пищевой продукции с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Допускается применение настоящего метода при определении в пищевой продукции кофеина, сорбиновой и бензойной кислот, а также других добавок, приведенных в настоящем стандарте.
Метод основан на экстрагировании искусственных подсластителей из пробы водой или разбавлении пробы водой, очистке экстракта методом твердофазной экстракции или с помощью реактивов Карреза и последующем количественном определении подсластителей с помощью ВЭЖХ с применением хроматографической колонки с обращенно-фазовым сорбентом и спектрофотометрического детектирования при длине волны 220 нм.
Высокоэффективный жидкостный хроматограф, укомплектованный ультрафиолетовым (УФ) детектором (пригодным для работы при длине волны 220 нм, предпочтителен диодно-матричный детектор), самописцем и/или интегратором, позволяющим измерять высоту и площадь пиков.
Хроматографическая колонка для ВЭЖХ, заполненная обращенно-фазовым сорбентом, с неподвижной фазой RP С18 с размером частиц 3-10 мкм, длиной 100-300 мм, внутренним диаметром 3-4 мм, с защитной колонкой, заполненной сорбентом RP С18 (на усмотрение пользователей настоящего стандарта, но обычно рекомендуется при анализе проб твердой консистенции).
Колонка для твердофазной экстракции, с картриджем RP С18 (на усмотрение пользователей настоящего стандарта), содержащая 500 мг сорбента.
Высокоскоростной блендер или гомогенизатор.
Колбы мерные вместимостью 1000, 500 и 100 см3.
Мензурка вместимостью 1000 см3.
Пипетки вместимостью 100, 25, 20, 10, 5 и 1 см3.
Пипеточный дозатор вместимостью 1000 мм3.
Градуированный цилиндр вместимостью 1000 см3.
Складчатая фильтровальная бумага, обеспечивающая среднюю скорость фильтрации.
Ультразвуковая баня.
Центрифуга с центрифужными пробирками, подходящей вместимости, обеспечивающая центробежное ускорение в основании центрифужных пробирок не менее 1400g.
Устройство для дегазации растворителей (на усмотрение пользователей настоящего стандарта).
Мембранные фильтры с размером пор не более 0,45 мкм.
Держатель мембранных фильтров с подходящим шприцем.
Ацетонитрил для ВЭЖХ.
Метанол для ВЭЖХ.
Калий фосфорнокислый однозамещенный (KH2PO4).
Калий фосфорнокислый двухзамещенный (K2HPO4).
Кислота фосфорная, ρ20(Н3РО4)=1,71 г/см3, w(H3PO4)=85%.
Кислота фосфорная, раствор массовой долей w(H3PO4)=5%.
Раствор Карреза N 1. Растворяют 15 г гексацианоферрата калия (II) (K4[Fe(CN)6]·3H2O) в некотором количестве воды и разбавляют до объема 100 см3.
Раствор Карреза N 2. Растворяют 30 г сульфата цинка (ZnSO4·7H2O) в некотором количестве воды и разбавляют до объема 100 см3.
Фосфатный буферный раствор I, с(KH2PO4)=0,02 моль/дм3, рН≈4,3. Растворяют 2,72 г однозамещенного фосфорнокислого калия в 800 см3 воды в мензурке вместимостью 1000 см3. Значение рН раствора доводят до 4,3 добавлением раствора фосфорной кислоты. Переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 см3, объем содержимого в колбе доводят до метки водой.
Фосфатный буферный раствор II, с(KH2PO4)=0,0125 моль/дм3, рН≈3,5. Растворяют 1,70 г однозамещенного фосфорнокислого калия в 800 см3 воды в мензурке вместимостью 1000 см3. Значение рН раствора доводят до 3,5 добавлением раствора фосфорной кислоты. Переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 см3, объем содержимого в колбе доводят до метки водой.
