Продукция соковая. Методы определения антоцианинов.
ГОСТ 32709-2014
Настоящий стандарт распространяется на фруктовые соки и нектары, фруктовые концентрированные соки, фруктовые пюре и концентрированные пюре, морсы и концентрированные морсы, сокосодержащие напитки из фруктов, имеющих красную, синюю и фиолетовую окраску, включая соковую продукцию обогащенную и для детского питания (далее - соковая продукция), и устанавливает следующие методы определения антоцианинов:
- метод высокоэффективной обращенно-фазовой жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) для качественного определения антоцианинов в соковой продукции;
- метод рН-дифференциальной спектрофотометрии для определения массовой концентрации (массовой доли) суммы антоцианинов в соковой продукции.
Диапазон измерений массовой концентрации (массовой доли) суммы антоцианинов в пересчете на цианидин-3-глюкозид - от 5 мг/дм3 (млн-1) до 5000 мг/дм3 (млн-1).
Предел обнаружения метода - 1 мг/дм3 (млн-1).
Метод обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)
Метод основан на определении индивидуальных антоцианинов путем их разделения на твердом носителе, привитом на высокочистую силикагелевую основу по обращенно-фазовому механизму с последующим фотометрическим детектированием при длине волны 518 нм.
Метод рН-дифференциальной спектрофотометрии
Метод основан на применении рН-дифференциальной спектрофотометрии. Массовую концентрацию (массовую долю) суммы антоцианинов в пересчете на цианидин-3-глюкозид в соковой продукции определяют на основе изменения поглощения света с длиной волны 510 нм при изменении кислотности растворов соковой продукции от 1 до 4,4 ед. рН.
Метод обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)
Хроматограф жидкостный высокоэффективный с насосом высокого давления и спектрофотометрическим детектором (рабочий диапазон длин волн поглощения от 200 до 600 нм) с относительным среднеквадратическим отклонением выходных сигналов не более 5% (по площади и времени выхода пиков), снабженный программно-аппаратным комплексом для сбора и обработки данных.
Колонка для ВЭЖХ длиной 250 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращенной фазой - октадецилсиликагелем С18, размером частиц 5 мкм. Колонки марок Phenomenex Luna и Hypersil С18 обеспечивают требуемую эффективность. Данная информация не является рекламой указанных колонок и приведена для удобства пользователей настоящего стандарта.
Микрошприцы хроматографические вместимостью 10 мм3, ценой деления 0,1 мм3 и вместимостью 20 мм3, ценой деления 0,2 мм3.
Весы лабораторные по ГОСТ OIML R 76-1 высокого класса точности с наибольшим пределом взвешивания не более 150 г со значением среднеквадратического отклонения (СКО), не превышающим 0,05 мг, и пределом допускаемой абсолютной погрешности ±0,005 г.
Фильтры мембранные с диаметром пор 0,20 и 0,45 мкм для фильтрования подвижной фазы и проб.
рН-метр по ГОСТ 9245 с диапазоном измерений от 2 до 14 ед. рН, погрешностью измерений не более 0,05 ед. рН, снабженный комбинированным стеклянным электродом.
Пипетки градуированные 1-2-1, 1-2-2, 1-2-5, 1-2-10 и 1-2-25 по ГОСТ 29227.
Колбы мерные 2-25-2 и 2-100-2 по ГОСТ 1770.
Емкости для жидких проб (виалы) вместимостью 2-10 см3.
Центрифуга лабораторная с фактором разделения не менее 1000 g.
Посуда лабораторная стеклянная по ГОСТ 25336:
- воронки лабораторные,
- стаканы В-1-50, В-1-100 и Н-1-1000.
Вода по ГОСТ ИСО 3696, 2-й степени чистоты.
Ацетонитрил для градиентной ВЭЖХ, массовой долей основного вещества не менее 99%.
Кислота ортофосфорная по ГОСТ 6552, ч.д.а.
Пробирки полимерные центрифужные с завинчивающейся крышкой вместимостью 15 см3.
Установка лабораторная для вакуумной фильтрации жидкостей с мини-насосом.
Соковыжималка бытовая, блендер бытовой или гомогенизатор любой конструкции.
Метод рН-дифференциальной спектрофотометрии
Спектрофотометр, позволяющий проводить измерения в диапазоне длин волн от 200 до 900 нм, с допустимой абсолютной погрешностью измерения коэффициента пропускания ±1%.
Кюветы кварцевые для спектрофотометрии с длиной оптического пути 10 мм.
Установка ультразвуковая с частотой ультразвука 43-45 кГц.
Аппарат для встряхивания проб.
Весы лабораторные по ГОСТ OIML R 76-1 специального (1-го) класса точности с наибольшим пределом взвешивания не более 150 г со значением среднеквадратического отклонения (СКО), не превышающим 0,03 мг и пределом допускаемой абсолютной погрешности ±0,001 г.
Весы лабораторные по ГОСТ OIML R 76-1 высокого класса точности с наибольшим пределом взвешивания не более 150 г со значением среднеквадратического отклонения (СКО), не превышающим 0,05 мг и пределом допускаемой абсолютной погрешности ±0,005 г.
рН-метр по ГОСТ 9245 с диапазоном измерений от 2 до 14 ед. рН, погрешностью измерений не более 0,05 ед. рН и снабженный комбинированным стеклянным электродом.
Фильтры мембранные с диаметром пор 0,45 мкм.
Центрифуга лабораторная с фактором разделения не менее 1000 g.
Пробирки полимерные центрифужные с завинчивающейся крышкой вместимостью 15 см3.
Колбы мерные 2-50-2, 2-100-2, 2-250-2 по ГОСТ 1770.
Пипетки 4-1-2 или 5-1-2, 4-2-10 или 5-2-10, 4-2-25 или 5-2-25 по ГОСТ 29227.
Вода по ГОСТ ИСО 3696 не ниже 2-й степени чистоты.
Цианидин-3-О-глюкозид (куромаин) хлористый для ВЭЖХ C21H21ClO11 массовой долей основного вещества не менее 95%.
Натрий уксуснокислый 3-водный по ГОСТ 199, ч.д.а.
Калий хлористый по ГОСТ 4234, ч.д.а.
Кислота соляная по ГОСТ 3118, х.ч.
