Продукты пищевые. Методы выявления и определения содержания афлатоксинов В1 и М1.
ГОСТ 30711-2001
Настоящий стандарт распространяется на пищевые продукты и устанавливает методы выявления и определения содержания афлатоксинов В1 и М1.
Метод тонкослойной хроматографии
Метод основан на экстракции афлатоксинов B1 и M1 из пробы продукта, очистке экстракта от мешающих веществ и измерении массовой концентрации афлатоксинов В1 и М1 с помощью тонкослойной хроматографии при визуальном определении количества вещества в пятне.
Диапазон измеряемых содержаний афлатоксина B1 во всех продуктах, кроме молочных: 0,003-0,02 мг/кг; в молочных продуктах: 0,0005-0,003 мг/кг; афлатоксина М1 - 0,0005-0,005 мг/кг.
Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии
Метод основан на экстракции афлатоксинов В1 и M1 из пробы продукта, очистке экстракта от мешающих веществ и измерении массовой концентрации афлатоксинов В1 и М1 в экстракте с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с флюориметрическим детектированием.
Диапазон измеряемых содержаний афлатоксина B1 во всех продуктах, кроме молочных: 0,003-0,02 мг/кг; в молочных продуктах: 0,0005-0,003 мг/кг; афлатоксина М1 - 0,0005-0,005 мг/кг.
Метод тонкослойной хроматографии
Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 20 г не ниже 2-го класса точности.
Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 500 г не ниже 4-го класса точности.
Спектрофотометр диапазоном измерения, позволяющим проводить исследования при длине волны 360 нм, с допустимой абсолютной погрешностью измерений коэффициента пропускания не более 1%; кюветы кварцевые рабочей длиной 10 мм.
Шкаф сушильный, обеспечивающий поддержание заданного температурного режима от 40 до 150 °С с температурной погрешностью ±5 °С.
Центрифуга лабораторная, обеспечивающая скорость вращения 4000 об/мин, стаканы центрифужные стеклянные вместимостью 200 см3.
Испаритель ротационный ИР 2М или аналогичный.
Прибор для флуоресцентного анализа витаминов в растворе мод.833 или диагностическая лампа ОЛД 41, снабженные светофильтром УФС 1, УФС 2 или УФС 5 по ГОСТ 9411.
Аппарат для встряхивания проб типа АВУ-6С.
Баня водяная.
Электроплитка по ГОСТ 14919.
Термометр жидкостный стеклянный по ГОСТ 28498 с допускаемой погрешностью ±2 °С в диапазоне измерений 0-100 °С.
Микрошприц МШ-10 вместимостью 0,01 см3.
Камера для тонкослойной хроматографии с притертой крышкой.
Насос водоструйный лабораторный по ГОСТ 25336.
Колбы мерные по ГОСТ 1770 исполнения 2 вместимостью 10, 100 и 250 см3.
Цилиндр по ГОСТ 1770 с взаимозаменяемым конусом вместимостью 100 см3.
Пипетки по ГОСТ 29227 типа 3 исполнения 1 1-го класса точности вместимостью 1 и 10 см3.
Воронка делительная по ГОСТ 25336 с взаимозаменяемым конусом вместимостью 250 см3.
Воронка лабораторная по ГОСТ 25336 типа В диаметром 56 мм и высотой 80 мм.
Колба плоскодонная по ГОСТ 25336 исполнения 2 вместимостью 250 см3.
Колба грушевидная по ГОСТ 25336 с взаимозаменяемым конусом 14/23 вместимостью 100 см3.
Колба остродонная по ГОСТ 25336 с взаимозаменяемым конусом 14/23 вместимостью 25 см3.
Распылитель стеклянный с грушей.
Колонка стеклянная хроматографическая длиной 300 и внутренним диаметром 20 мм.
Фильтры бумажные обеззоленные марки ФОМ по ГОСТ 12026.
Вата медицинская гигроскопическая по ГОСТ 5556.
Силикагель Л, 100-160 или 100-250 мкм, фирма "Лахема", Чехия.
Флоризил, 60-100 меш, фирма "Мерк", Германия.
Пластинки для тонкослойной хроматографии "Силуфол" 15х15 см, фирма "Кавалиер", Чехия.
Пластинка стеклянная 20х20 см.
Афлатоксин B1 кристаллический, фирма "Серва", Германия.
Афлатоксин В2 кристаллический, фирма "Серва", Германия.
Афлатоксин М1 кристаллический, фирма "Серва", Германия.
Ацетон по ГОСТ 2603, ч.д.а.
Бензол по ГОСТ 5955, ч.д.а.
Ацетонитрил, ч.
Гексан, ч.
Метанол-яд по ГОСТ 6995, ч.
Хлороформ технический по ГОСТ 20015.
Эфир этиловый технический.
1,4-Диоксан по ГОСТ 10455, ч.д.а.
Йод по ГОСТ 4159, х.ч., раствор в этиловом эфире массовой концентрации 100 г/дм3.
Спирт изопропиловый, ч.д.а.
Кислота азотная по ГОСТ 4461, ч.д.а., водный раствор 1:2.
Кислота лимонная 1-водная по ГОСТ 3652, ч.д.а.
Кислота уксусная по ГОСТ 61, ч.д.а.
Серебро азотнокислое по ГОСТ 1277, х.ч., раствор массовой концентрации 250 г/дм3.
Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166, х.ч.
Натрий хлористый по ГОСТ 4233, ч.д.а., растворы массовыми концентрациями 40 г/дм3 и 100 г/дм3.
Свинец (II) уксуснокислый основной, ч., раствор массовой концентрации 150 г/дм3.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии
При проведении испытания используют средства измерений, реактивы и материалы из метода ТХ со следующим дополнением:
Хроматограф жидкостный в составе:
- насоса высокого давления с верхним пределом давления не менее 25 МПа, диапазоном регулирования подачи растворителя не менее 0,1-5 см3/мин, погрешностью поддержания скорости подачи растворителя не более 2,5% при скорости потока 1,0 см3/мин и давлении 3,45 МПа;
- петлевого устройства ввода пробы с рабочим объемом петли 0,020 см3;
- флюориметрического детектора, позволяющего проводить исследования при длине волны возбуждающего излучения 360 нм и длине волны эмиссии 420 нм, с проточной кварцевой кюветой объемом от 0,015 до 0,025 см3, с уровнем флуктуационных шумов не более 8·10-5 ед. флюоресценции, относительной погрешностью измерения интенсивности флюоресценции не более 2%; пределом детектирования по антрацену 8·10-12 г/см3;
- регистрирующего устройства (самописца или интегратора), позволяющего проводить измерения при чувствительности 0,2 мВ/см, с погрешностью записи в рабочих условиях не более 0,5%;
- колонки длиной 250 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненной силикагелем с размером частиц 5 мкм. Эффективность колонки по афлатоксину B1 - не менее 20000 теоретических тарелок на метр.
Толуол по ГОСТ 5789, ч.д.а.
Эфир этиловый уксусной кислоты по ГОСТ 22300, ч.д.а.
Кислота муравьиная по ГОСТ 5848, ч.д.а.
