Продукты пищевые. Определение содержания нитрата и/или нитрита. Часть 4. Определение содержания нитрата и нитрита в мясных продуктах методом ионной хроматографии.
ГОСТ EN 12014-4-2015
Настоящий стандарт устанавливает метод определения нитрата и нитрита в мясных продуктах с помощью ионной хроматографии (ИХ). Метод прошел валидацию на различных видах мясных продуктов с содержанием (массовой долей) нитрата в диапазоне от 50 до 300 мг/кг (млн-1) и с содержанием (массовой долей) нитрита приблизительно 40 мг/кг (млн-1).
Примечание - В результате валидационных испытаний установлено, что приведенный в настоящем стандарте метод применим также для определения нитрата в овощах и детском питании. Кроме того, метод применим для определения нитрита в мясных продуктах с содержанием (массовой долей) нитрита более 40 мг/кг (млн-1).
Метод основан на экстрагировании нитрата и нитрита из пробы горячей водой, очистке экстракта от мешающих компонентов пробы путем разбавления экстракта ацетонитрилом и последующем определении нитрата и нитрита методом ИХ с применением спектрофотометрического детектирования при длине волны 205 нм.
Оборудование для ионной хроматографии
- Система для высокоэффективной жидкостной хроматографии, состоящая из изократического насоса высокого давления, спектрофотометрического детектора, пригодного для измерений при длине волны 205 нм, и системы обработки данных, например интегратора с устройством записи хроматограмм.
- Колонка аналитическая длиной 150 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная анионообменной полиметакрилатной смолой с привитыми четвертичными аммонийными функциональными группами с размером частиц 10 мкм сорбционной емкостью (30±3) мкэкв/см3, снабженная защитной колонкой длиной, например, 20 мм, заполненной тем же сорбентом.
Оборудование для гомогенизации проб, такое как измельчитель механический или электрический, обеспечивающий получение гомогенных проб, снабженный высокоскоростным режущим устройством, или мясорубка с решеткой с отверстиями диаметром не более 4,5 мм, а также гомогенизатор.
Мешалка магнитная.
Фильтры бумажные складчатые, не содержащие нитратов и нитритов
Фильтры мембранные для водных и ацетонитрильных растворов диаметром пор примерно 0,45 мкм.
Фильтры мембранные для водных и ацетонитрильных растворов диаметром пор примерно 0,22 мкм.
Держатель для мембранных фильтров с подходящим шприцем.
Колонки для твердофазной экстракции, заполненные обращенно-фазовым сорбентом типа RP C18 в комплекте с подходящими шприцами (используют по желанию пользователя настоящего стандарта).
Ацетонитрил.
Глицерин.
Лития гидроксид безводный или моногидрат.
Кислота борная массовой долей 99%.
Кислота соляная, раствор молярной концентрации с(HCl)=1,8 моль/дм3.
Кислота соляная, раствор молярной концентрации c(HCl)=0,1 моль/дм3.
Основной раствор нитрата и нитрита. В мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят 1,500 г нитрита натрия и 3,258 г нитрата калия. Содержимое колбы растворяют в воде, объем полученного раствора доводят до метки водой и тщательно перемешивают. Срок годности раствора - 2 недели при температуре хранения 4°С.
Градуировочные растворы нитрата и нитрита. Готовят шесть градуировочных растворов, для чего в мерные колбы вместимостью 200 см3 вносят 0; 0,1; 0,5; 1,0; 1,5 и 2,0 см3 основного раствора нитрата и нитрита, объем содержимого в колбах доводят до метки водой и перемешивают.
Раствор глюконовой кислоты. Глюконовую кислоту массой 50 г растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 см3, объем раствора в колбе доводят водой до метки.
Буферный раствор на основе бората и глюконата лития. В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 500 см3 воды, 34,00 г борной кислоты, 19,6 см3 раствора глюконовой кислоты и 11,00 г безводного гидроксида лития или 19,26 г моногидрата гидроксида лития. Содержимое колбы перемешивают до полного растворения компонентов, после чего в колбу добавляют 125 см3 глицерина, объем полученного раствора доводят до метки водой, содержимое колбы тщательно перемешивают.
Подвижная фаза для ИХ. В мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят 500 см3 воды, 17 см3 буферного раствора и 125 см3 ацетонитрила. Объем содержимого колбы доводят водой до метки, содержимое перемешивают. Значение рН полученного раствора доводят до 6,5±0,1 добавлением растворов соляной кислоты. Полученный раствор фильтруют через мембранный фильтр диаметром пор примерно 0,22 мкм.
