Продукты пищевые. Определение витамина В1 с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Спектрофотометр, пригодный для измерений оптической плотности в ультрафиолетовой области спектра при заданной длине волны.

Автоклав с контролем температуры и давления или плитка электрическая, или баня водяная с контролем температуры.

Хроматограф жидкостный. Система для ВЭЖХ, состоящая из насоса, инжектора, флюориметрического детектора, позволяющего проводить измерения при длинах волн возбуждения и эмиссии, указанных в приложении А, например, 366 нм и 420 нм соответственно, и устройства регистрации и обработки аналитического сигнала, например, интегратора.

Колонка для ВЭЖХ длиной от 100 до 250 мм, внутренним диаметром от 4,0 до 4,6 мм, заполненная сорбентом размером частиц 5 мкм.  Пригодность для проведения анализа установлена в отношении следующих марок сорбентов на основе силикагеля, доступных для приобретения: Lichrosorb Si-60, Spherosorb Si, Hypersil Si и Lichrospher 100 Diol. Пригодность для проведения анализа установлена в отношении следующих марок обращенно-фазовых сорбентов: Liuchrospher Si 60 RP Select, Spherisorb ODS, μ-Bondapak radial C18, Supelco C-18-DB и Hypersil ODS. Данная информация приведена исключительно для удобства применения настоящего стандарта, не является рекламной поддержкой МГС данных изделий и не исключает возможность использования других изделий с аналогичными свойствами.

Установка для фильтрации подвижной фазы перед ее использованием и раствора пробы для хроматографического анализа перед инжекцией через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм (продлевает срок службы аналитической колонки).

Система для послеколоночной дериватизации, состоящая из насоса для подачи реактива для дериватизации, соединительного элемента для трех капилляров и реактора в виде капилляра длиной 10 м и внутренним диаметром 0,33 мм.

Метанол для ВЭЖХ чистотой не менее 99,8%.

Кислота уксусная, раствор молярной концентрации c(CH₃COOH)=0,02 моль/дм³.

Спирт изобутиловый (изобутанол) чистотой не менее 98%.

Натрий фосфорнокислый однозамещенный чистотой не менее 99,8%.

Кислота соляная массовой долей 36%.

Кислота соляная, раствор молярной концентрации c(HCl)=0,1 моль/дм³.

Кислота серная, раствор молярной концентрации c(H₂SO₄)=0,05 моль/дм³.

Натрия гидроокись чистотой не менее 99%.

Натрия гидроокись, раствор массовой концентрации ρ(NaOH)=150 г/дм³.

Натрия гидроокись, раствор массовой концентрации ρ(NaOH)=200 г/дм³.

Калия гексацианоферрат (III) чистотой не менее 99%.

Калия гексацианоферрат (III), раствор массовой концентрации ρ(K₃[Fe(CN)₆])=10 г/дм³.

Калия гексацианоферрат (III), щелочной раствор массовой концентрации  ρ(K₃[Fe(CN)₆])=0,4 г/дм³ для предколоночной дериватизации.

Калия гексацианоферрат (III), щелочной раствор массовой концентрации  ρ(K₃[Fe(CN)₆])=0,5 г/дм³ для предколоночной дериватизации.

Дефосфорилирующий фермент, пригодный для гидролиза связанного тиамина в пробе. При установлении характеристик прецизионности методики использована Така-диастаза N Т00040 (Platz and Bauer, Waterbury, СТ 06708, США).

Натрий уксуснокислый, раствор молярной концентрации c(CH₃COONa·3H₂O)= 2,5 моль/дм³.

Натрий уксуснокислый, раствор молярной концентрации c(CH₃COONa·3H₂O)=0,5 моль/дм³.

Подвижные фазы для ВЭЖХ. Варианты подвижных фаз подходящего состава приведены в приложении A. В частности, в качестве подвижных фаз используют смеси метанола с водой, фосфатным или ацетатным буферным раствором при объемной доле метанола от 10% до 50%, а также подвижные фазы с добавлением ион-парных реагентов.

Раствор буферный фосфатный (pH=3,5) молярной концентрации однозамещенного фосфата калия c(KH₂PO₄) =9,0 ммоль/дм³.

Тетраэтиламмония хлорид чистотой не менее 98%.

Натрия гептансульфонат чистотой не менее 98%.

Раствор буферный ацетатный (pH=4) молярной концентрации уксусной кислоты (CH₃COOH)=50 ммоль/дм³.

Тиаминхлорида гидрохлорид (C₁₂H₁₇ClN₄OSHCl) чистотой не менее 99%.

Тиаминмонофосфатхлорид (C₁₂H₁₇ClN₄O₄PS) чистотой не менее 98%.

Тиаминпирофосфатхлорид (кокарбоксилаза) (C₁₂H₁₉ClN₄O₇P₂S) чистотой не менее 98%.