Сок яблочный, сок яблочный концентрированный и напитки, содержащие яблочный сок. Метод определения содержания патулина с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии.
ГОСТ Р 51435-99
Настоящий стандарт устанавливает метод определения содержания патулина в яблочном соке, концентрированных яблочных соках и напитках, содержащих яблочный сок, с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Предел обнаружения патулина настоящим методом составляет 10 мкг/дм3 при условии, что взятый для анализа объем пробы готового к употреблению сока составляет 5 см3.
Метод основан на экстракции патулина из исследуемой пробы этилацетатом, очистке экстракта перераспределением в водный раствор карбоната натрия и количественном и качественном анализе экстракта с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием спектрофотометрического детектора в ультрафиолетовой области.
Жидкостный хроматограф, снабженный спектрофотометрическим детектором в ультрафиолетовой области (пригодным для работы при длине волны 276 нм) и самописцем или интегратором.
Обращенно-фазовая колонка ODS или другая аналогичная колонка со следующими параметрами:
- эффективность не менее 35000 теоретических тарелок на метр;
- длина 250 мм;
- внутренний диаметр 4,6 мм;
- неподвижная фаза размером частиц 5 мкм.
Этилацетат.
Подвижная фаза - раствор ацетонитрила в воде объемной концентрации 10%.
Экстрагирующий раствор - водный раствор безводного карбоната натрия концентрации 14 г/дм3.
Ацетатный буфер, рН 4. Смешивают 16,4 см3 уксусной кислоты [c(CH3COOH)=0,2 моль/дм3] с 3,6 см3 раствора ацетата натрия [c(CH3COONa)=0,2 моль/дм3].
Уксусная кислота, ледяная.
Стандартный раствор патулина (C7H6O4).
