Зерно и продукты его переработки, комбикорма. Определение содержания зеараленона методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.
ГОСТ 31691-2012
Настоящий стандарт устанавливает метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с флуориметрическим или фотометрическим детектированием для определения содержания зеараленона (синоним: токсин Ф2) в пробах зерна (пшеница, кукуруза, ячмень) и продуктах его переработки, комбикормов и сырья для их производства на зерновой основе (жмых, шрот).
Диапазон значений массовой доли зеараленона составляет от 0,1 до 10 мг/кг.
Метод основан на экстракции зеараленона из пробы хлороформом, очистке полученного экстракта и определении зеараленона методом обращенно-фазовой жидкостной хроматографии с флуориметрическим или фотометрическим детектированием.
Жидкостный хроматограф с флуориметрическим (спектрофлуориметрическим) детектором, обеспечивающим возбуждение флуоресценции в диапазоне длин волн (270±20) нм и регистрацию интенсивности флуоресценции в диапазоне длин волн от 450 до 470 нм или с фотометрическим (спектрофотометрическим) детектором, позволяющим проводить измерения оптической плотности в диапазоне длин волн (270±20) нм. Применяемый детектор должен обеспечивать предел обнаружения зеараленона в подвижной фазе не более 0,1 мкг/см3. Метрологические характеристики метода не зависят от вида используемого детектора.
Хроматографическая колонка с обращенно-фазовым сорбентом, имеющая эффективность не менее 40000 теоретических тарелок на метр по пику зеараленона, например Кромасил С18 длиной 150 мм и внутренним диаметром 2,1 мм.
Предколонка, заполненная обращенно-фазовым сорбентом.
Весы лабораторные общего назначения среднего класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по ГОСТ 24104 и ценой наименьшего деления 0,01 г.
Пипетки градуированные 2 класса точности вместимостью 1, 5, 10 см3 по ГОСТ 29227.
Колбы мерные 2 класса точности вместимостью 100, 200, 500 см3 по ГОСТ 1770.
Цилиндры мерные 2 класса точности вместимостью 50, 100, 250 см3 по ГОСТ 1770.
Стандартные образцы состава раствора зеараленона в ацетонитриле номинального значения массовой концентрации 100 мкг/см3 и погрешностью аттестованного значения не более ±5,0 мкг/см3.
Испаритель роторный ИР-1М2 или аналогичный.
Насос лабораторный вакуумный, мембранный или водоструйный по ГОСТ 25336, обеспечивающий разрежение от 2,5 до 10 кПа.
Устройство для перемешивания проб, обеспечивающее частоту вращения до 120 мин-1.
Измельчитель проб, обеспечивающий их измельчение до частиц менее 1 мм.
Шкаф сушильный, обеспечивающий температуру до 200 °С.
Холодильник бытовой.
Сито с отверстиями диаметром 1 мм.
Бумага индикаторная универсальная для диапазона значений рН от 1 до 10 или рН-метр любого типа с диапазоном измерений рН от 1 до 14 с пределом допускаемой абсолютной погрешности не более ±0,1.
Воронки делительные вместимостью 100 или 250 см3 по ГОСТ 25336.
Воронки химические по ГОСТ 25336.
Колбы плоскодонные вместимостью 100, 1000 см3 по ГОСТ 25336.
Колбы остродонные для упаривания вместимостью 10 или 50 см3 по ГОСТ 25336.
Фильтры бумажные "красная лента".
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709 или вода для лабораторного анализа первой степени чистоты.
Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166, х.ч.
Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, оптическая плотность при 200 нм - не более 0,025 относительно дистиллированной воды, массовая доля воды - не более 0,03%.
Хлороформ по ГОСТ 20015, очищенный.
Натрия гидроксид по ГОСТ 4328, х.ч.
Ортофосфорная кислота по ГОСТ 6552, х.ч.
Кислота серная по ГОСТ 4204, ч.д.а.
Азот газообразный по ГОСТ 9293.
