Ион-парная хроматография

Во всех рассмотренных выше вариантах ЖХ удерживание в конечном счете определялось сродством частиц сорбата с поверхностью сорбента. Качественно новые свойства хроматографические системы могут приобретать, если в ПФ вводят динамический модификатор. Под этим термином обозначают такой компонент, который постоянно поступает в колонку вместе с ПФ и, находясь в динамическом равновесии с другими компонентами системы, изменяет механизм сорбции и селективность системы. Практически важным частным случаем динамического модифицирования является метод ион-парной хроматографии. Суть метода заключается в динамическом модифицировании обращенно-фазового сорбента (октил-, октадецилсиликагеля) группами, обладающими ионообменными свойствами. Для этих целей в типичные подвижные фазы для ОФХ добавляют гидрофобные органические соединения с ионогенными группами. Для разделения оснований используют алкилсульфаты натрия (алкил от С₄ до С₁₂) в количестве 0.001-0.01 моль/л, создавая буферным раствором рН=2-5. Для разделения кислот применяют соли тетраалкиламмония (фосфат тетрабутиламмония, бромид цетилтриметиламмония и др.) в концентрациях 0.001-0.01 моль/л и рН=3-7. В ион-парном режиме селективность разделения неионогенных компонентов анализируемой пробы будет лимитироваться обращенно-фазовым механизмом удерживания, а удерживание оснований и кислот заметно возрастет, улучшится форма их хроматографических пиков.

Удерживание в ион-парном режиме обусловлено достаточно сложными равновесными процессами, конкурирующими между собой. С одной стороны, за счет гидрофобных взаимодействий и эффекта вытеснения из полярной среды подвижной фазы возможна сорбция гидрофобных ионов на поверхности алкилсиликагеля таким образом, что алкильный фрагмент динамического модификатора прижат к поверхности, а заряженные группы обращены к подвижной фазе. В этом случае поверхность приобретает ионообменные свойства и удерживание подчиняется закономерностям ионообменной хроматографии. С другой стороны, возможно образование ионной пары непосредственно в объеме элюента, затем эта пара сорбируется на неполярной поверхности по обращенно-фазовому механизму.